Apat na taon pagkatapos ng pagkatalo ng Enchantress, nakipaghiwalay ang Joker kay Harley Quinn, na itinapon siya sa mga lansangan ng Gotham City. Siya ay pinatuloy ni Doc, ang may-ari ng isang Taiwanese restaurant, habang nagpapagaling mula sa kanyang nasirang relasyon sa pamamagitan ng paggupit ng kanyang buhok, pag-aampon ng isang batikang hyena (na pinangalanan niya pagkatapos ni Bruce Wayne), at pagkuha ng roller derby.
Si Harley ay nalasing sa isang nightclub na pagmamay-ari ni Roman Sionis, isang walang awa na kriminal, at pinilayan niya ang driver nito matapos siyang insultuhin. Nakilala niya ang burlesque singer na si Dinah Lance, na kalaunan ay nagligtas sa kanya nang pagtangkaan siyang dukutin. Hanga si Sionis sa mga kasanayan sa pakikipaglaban ni Dinah at itinalaga siya bilang kanyang bagong driver. Kinabukasan, pinasabog ni Harley ang planta ng Ace Chemicals bilang isang paraan upang ibalita sa publiko ang paghihiwalay nila ni Joker. Samantala, iniimbestigahan ni GCPD Detective Renee Montoya ang isang serye ng pagpatay sa mga nagkakagulong mga tao na isinagawa ng isang vigilante na gumagamit ng crossbow. Nakita nito ang kuwintas ni Harley sa pinangyarihan ng pagsabog ng Ace Chemicals, sinabi ni Montoya na nasa panganib si Harley ngayong wala na ang proteksyon ng Joker. Sinubukan niyang i-recruit si Dinah bilang isang impormante, ngunit tinanggihan ni Dinah ang alok.
Pinadala ni Sionis si Dinah at ang kanyang sadistikong kanang kamay na si Victor Zsasz upang kunin ang isang brilyante na naka-embed na may mga numero ng account ng pamilya Bertinelli, ang pinakamayaman sa siyudad, na pinaslang taon na ang nakararaan. Ang batang pickpocket na si Cassandra "Cass" Kain ay ninakaw ang brilyante mula kay Zsasz at nilamon ito matapos na siya ay arestuhin. Si Harley, tumatakas mula kay Montoya at maraming iba pang mga tao na pinagkasalaan niya, ay dinakip ng mga tauhan ni Sionis. Ipinaalam ni Zsasz kay Sionis na si Cassandra ay may brilyante, at binalaan ni Dinah si Montoya. Naatasan si Harley na hanapin ang brilyante para sa kanya, sa ilalim ng banta ng kamatayan, at naglalagay din ng isang biyaya kay Cassandra. Pinasok niya ang GCPD na may dalang iba't ibang mga firework-inspired na hindi nakamamatay na grenade launcher, pinalaya ni Harley si Cassandra at tumakas ang pares.
Matapos makatakas, nag-bonding sina Harley at Cassandra habang nagtatago sa apartment ng una. Si Doc ay nilapitan para sa impormasyon ng "crossbow killer", na isiniwalat na si Helena Bertinelli. Nakaligtas sa patayan ng kanyang pamilya at naging bihasa bilang isang mamamatay-tao, na-target ni Helena ang bawat isa sa mga gangsters na responsable para sa pagpatay sa kanyang pamilya, at mas gusto niya ang moniker na "Huntress". Ang apartment ni Harley ay binomba ng mga kriminal na naghahanap kay Cassandra, at malungkot na isiniwalat ni Doc na ipinagbili niya si Harley. Tinawagan ni Harley si Sionis at inaalok na ibibigay si Cassandra bilang kapalit ng kanyang proteksyon, pumayag na magtagpo sila sa isang inabandunang parke. Inabisuhan ni Dinah si Montoya tungkol sa pagtatagpo, ngunit ang kanyang pagtataksil ay napansin ni Zsasz, na nagsabi kay Sionis. Ang isang wasak na si Sionis ay tinawag ang kanyang pang-ritwal na maskara mula sa kung saan nakakuha siya ng kanyang palayaw, "Black Mask".
Sa parke, hinarap ni Montoya si Harley, ngunit kinatok siya ni Harley sa isang bintana. Dumating si Zsasz at pinayapa si Harley bago hawakan si Dinah sa baril, ngunit pinatay siya ni Helena, na nagsabing si Zsasz ang huling tao na kabilang sa pumatay sa kanyang pamilya. Bumalik si Montoya, at isang stand-off ang nagaganap hanggang sa mapagtanto nilang dumating si Sionis kasama ang isang maliit na hukbo ng mga nakatakip na kriminal. Gamit ang lumang gamit ni Harley, matagumpay na nakatiis at maitaboy ng pansamantalang koponan ang kanilang atake. Sa panahon ng labanan, si Cassandra ay dinakip ni Sionis, habang ipinahayag ni Dinah ang kanyang metahuman na kakayahang maka-sigaw sa antas na supersonic, na tinalo ang maraming mobsters ni Sionis. Nagbibigay si Harley ng paghabol gamit ang roller skate, at sa tulong mula kay Helena, hinabol ng pares si Sionis. Sa isang kalapit na pier, nangyayari ang pangwakas na komprontasyon. Inihanda ni Sionis na patayin si Cassandra, ngunit hinugot niya ang singsing mula sa isang granada na isinuksok niya sa kanyang jacket matapos itong makuha mula sa dibdib ng sandata ni Harley kanina. Itinapon ni Harley si Sionis sa pier bago sumabog ang granada, na pumatay dito.
Sa resulta ng pagwasak sa kriminal na emperyo ni Sionis, umalis si Montoya sa GCPD. Gamit ang pera sa loob ng mga account na nakatago sa loob ng brilyante (na nakuha mula kay Cassandra), sumali si Helena kina Dinah at Montoya sa pagtataguyod ng isang pangkat ng mga vigilantes na tinawag na Mga Birds of Prey. Tumakas sina Harley at Cassandra, na ipinagbili ang mismong brilyante sa isang pawn shop at nagsimula ng kanilang sariling negosyo.
Cast and Characters:
Margot Robbie as Harley Quinn
Rosie Perez as Renee Montoya
Mary Elizabeth Winstead as Helena Bertinelli…
Jurnee Smollett as Dinah Lance
Ewan McGregor as Roman Sionis
Ella Jay Basco as Cassandra Cain
Chris Messina as Victor Zsasz
